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北京智鼠多宝生物科技有限责任公司
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转棒疲劳仪(施灸赫依三穴对失眠模型大鼠行为学及脑组织IL-6含量的影响)

施灸赫依三穴对**模型大鼠行为学及脑组织IL 含量的影响

乎宝力格高玉峰 苏日古嘎

  内蒙古民族大学附属医院内蒙古  通辽0280072.内蒙古民族大学内蒙古  通辽028000

摘    要目的观察施灸赫依三穴对**模型大鼠行为学及脑干组织中IL 含量的影响方法60只正常雄性SD 大鼠按体重随机分为 分别为正常组模型组安定组顶会穴组赫依穴组和黑白际穴组每组各10除正常组外其余 组腹腔注射 PCPA 混悬液100连续注射 天制造大鼠**模型成功造模后进行干预正常组常规喂养模型组每天抓取固定常规喂养安定组灌胃安定***注射液0.92每日连续灌胃顶会穴组赫依穴组和黑白际穴组分别施灸相应的穴位每日施灸每次5min连续通过转棒平衡实验和定位航行实验观察比较各组大鼠棒上停留时间和找到平台的时间并采用 ELISA 法检测大鼠脑干IL 的含量结果转棒平衡实验模型组大鼠在转棒上维持时间缩短与正常组比较差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠在转棒上维持的时间显著增加差异具有统计学意义

0.05定位航行实验模型组大鼠找到站台的时间延长与正常组比较差异具有统计学意义 0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠找到站台的时间显著缩短差异具有统计学意义0.05模型组大鼠脑干中IL 含量显著高于正常组差异具有统计学意义 0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠脑干中IL 含量显著降低差异具有统计学意义0.05结论蒙医施灸赫依三穴可降低**大鼠脑干中IL含量从而使大脑兴奋性降低其机制可能与调节**大鼠脑干中IL含量相关

关键词**蒙医灸疗行为学白细胞介素

 

随着社会的发展生活节奏的加快**成为流行病之其严重影响人们生活质量可诱发诸多**蒙医理论  认为**的病因分为外因和内因外因系劳逸失调思虑太惊吓失血等内因系赫依琪素紊乱累及心脏白脉大多属“赫依病”范畴前期研究已表明施灸赫依三穴对**模型大鼠有**作用可降低**神经系统中重要的神经递质———NO 与 NOS的活性白细胞介素IL是具有多种生物学功能的细胞因子参与睡眠 觉醒过程具有调控睡眠的作用笔者在前期研究的基础上观察施灸赫依三穴对**大鼠行为学变化及脑干内IL 含量的影响进一步探讨其****的作用机制

材料与试药

1.1   实验动物

实验动物选择健康雄性 SD 大鼠60 体重约200± 10全部大鼠均由沈阳实验动物中心 提供合 格证号

SXSK20150001

1.2   试剂与仪器

ZB200疲劳转棒仪北京智鼠多宝生物科技有限责任公司AUW120D 型岛津电子天平日本岛津定位航行试验水槽北京智鼠多宝生物科技有限责任公司Biote 800酶标仪美国公司);对氯苯丙氨酸PCPA  北京环亚太克生物医学技术有限公司);艾灸贴苏州东方艾绒厂IL酶联**分析ELISA试剂盒广州瑞博奥生物科技有限公司

2.1   造模方法

本实验采用公认的对氯苯丙氨酸PCPA造模法制备**大鼠模型 PCPA 用生理盐水配制成混悬液 45100除正常组外其余组大鼠腹腔注射 PCPA 混悬液100每天连续注射大鼠出现活动明显频繁对外界的声光等刺激异常敏感兴奋性增高昼伏夜出节律消失等表明造模成功

2.2   分组及处理方法

60SD 雄性大鼠随机分为6 即正常组模型安定组顶会穴组赫依穴组黑白际穴组每组10正常组大鼠腹腔注射19%氯化钠溶液10

每日连续注射与**组相同的抓取固定不做任何**连续

模型组造模成功后同灸疗组一样抓取固定安定组 模成功 西 0.92每日连续灌胃顶会穴组造模成功后施灸大鼠顶会穴每日 赫依穴组造模成功后施灸大鼠赫依穴每日 黑白际穴组造模成功后施灸大鼠黑白际穴每日 连续

2.3   观察指标与检测方法

2.3.1转棒平衡实验 实验装置为单头固定的水平棒先将疲劳转棒仪调整到训练状态使各组大鼠适应将疲劳转棒仪调到20rmin当直棒转动时将大鼠放在转棒上记录大鼠在转棒上持续不落降的时间每只大鼠重复测定取平均值

2.3.2  定位航行实验 实验时向水箱里加入自来水和适量牛奶使液体与水箱颜色一致水平面高于站台2cm水温控制在24±2实验前将各组大鼠放入水箱内自由游泳120s未找到站台人为将其移至到站台上使大鼠熟悉水箱内环境测试时将大鼠沿水箱壁轻巧放入水记录大鼠找到站台的时间若大鼠放入水中120s内未找到站台120s

  大鼠脑干中 含量测定 组大鼠快速断头处死冰上迅速取大脑干称重-80℃ 冰箱保存待测100组织加入500μ 裂解液冰上裂解30振荡在冰上用高速分散切割机进行组织破碎冷冻离心机离心1300020取上清液采用 ELISA 按照IL试剂盒说明书的步骤在酶标仪上的540595波长范围内检测吸光度其中562nm 波长为*佳测量光密度值计算出IL含量

2.4   统计学方法

所得数据录入SPSS170统计学软件连续性计量资料以平方差 表示数据比较使用独立样本 检验等级数据资料以百分比表示数据间比较采用卡方检验0.05为差异具有统计学意义

3.1   各组大鼠转棒平衡实验结果比较

与正常组相比模型组大鼠在转棒上维持时间缩短差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组和黑白际穴组大鼠在转棒上维持时间延长差异具有统计学意义0.05见表


3.2   各组大鼠定位航行实验结果比较

与正常组相比模型组大鼠找到站台的时间延长差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组和黑白际穴组大鼠找到站台时间显著缩短 差异具有统计学意义0.05见表


3.3   各组大鼠脑干中IL含量比较与正常组相比模型组大鼠脑干IL含量显著升高差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组和黑白际穴组大鼠脑干含量显著降低差异具有统计学意义0.05见表


蒙医理论认为人体体素相搏导致无法正常入睡称为**属于“赫依病”范畴蒙医灸疗法具有通络****之功效赫依三穴是指赫依穴顶会穴黑白际穴赫依穴位于第七颈椎棘突与**胸椎棘突间隙窝中顶会穴位于两耳角直上连线中点头顶正中心黑白际穴位于两乳正中对直的心窝处。《甘露四部中记载“赫依偏盛引起的**以顶会穴赫依穴黑白际穴灸之


大鼠体内黄芩苷镁盐分析方法建立

许海舰刘一鑫常金花刘翠哲

承德医学院  河北省中药研究与开发重点实验室 承德医学院中药研究所河北  承德067000

    目的建立 wistar大鼠体内黄芩苷镁盐的高效液相色谱分析方法方法采用安捷伦1260型高效液相色谱仪色谱柱选择 18 色谱柱4.6×250μ流动相选择乙腈∶0.2% 23∶77∶V流速为1.0mLmin检测波长设为278nm柱温为37℃ 结果黄芩苷镁盐在0.12550μg 范围内线性关系良好 0.999925μg12.5μg)、0.125μg三个浓度生物样品的平均加样回收率分别为98.14% 97.12% 99.45% n=3结论建立黄芩苷镁盐在大鼠体内的分析方法专属性好精密度准确度重复性稳定性和加样回收率等各项指标均达到 生物样品中**定量分析研究方法学的要求

关键词黄芩苷镁盐高效液相色谱分析方法

中图分类28 文献标识 文章编号167219201001黄 芩 始 载 于 神 农 本 草 经 为 唇 形 科 植 物 黄 芩白细胞介素IL是多功能细胞因子研究表明机体夜 间睡眠剥夺后第 天血液中IL 含量增多10等发现 IL含量因睡眠减少而增加因睡眠状况好转而降低11本研究结果表明模型组大鼠在转棒上维持时间缩短与正常组比较差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠在转棒上维持的时间显著增加差异具有统计学意义0.05模型组大鼠找到站台的时间延长与正常组比较差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠找到站台的时间显著缩短差异具有统计学意义0.05模型组大鼠脑干中IL 含量显著高于正常组差异具有统计学意义0.05与模型组比较安定组赫依穴组顶会穴组黑白际穴组大鼠脑干中IL含量显著降低差异具有统计学意义0.05说明蒙医施灸赫依三穴可降低**大鼠脑干中IL 含量从而使大脑兴奋性降低其机制可能与调节**大鼠脑干中IL含量有关



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